细胞解冻步骤
- 准备37°C恒温水浴锅
- 从液氮罐中取出冻存管，立即放入15ml离心管（做好生物安全防护）
- 快速转移至水浴锅，轻柔摇晃直至细胞悬液完全解冻（约2分钟）
- 用70%乙醇擦拭冻存管表面，转移到生物安全柜
培养基配置
| 组分 | 体积 | 终浓度 |
|---|---|---|
| DMEM高糖培养基 | 445 ml | 89% (v/v) |
| 胎牛血清(FBS) | 50 ml | 10% |
| 青霉素-链霉素 | 5 ml | 1% |
注意事项
- 解冻后细胞存活率应＞90%
- 离心参数：200×g，室温离心5分钟
- 悬浮细胞培养需每日观察聚集体（>50-100 μm）形成情况
- 培养基pH值维持在7.2-7.4（5% CO2培养箱）